Медицинский портал. студентам, врачам, медицинские книги

скачать медицинские учебники, лекции

Главная » Файлы » Иммунология

Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ)
21.04.2010, 14:34


Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) в присутствии митогена - конканавалина А (Кон А) является одним из методов определения функционального состояния Т-системы иммунитета. Реакция основана на способности Т-лимфоцитов в присутствии митогена выделять биологически активные вещества - лимфокины, в том числе факторы, ингибирующие миграцию лейкоцитов.

Материалы и реактивы

1. Гепаринизированная исследуемая кровь.
2. Конканавалин А.
3. Изотонический раствор хлорида натрия.
4. Воск или пластилин.
5. Капилляры из набора для определения С-реактивного белка.
6. Центрифужные пробирки.
7. Микроскоп с окуляр-микрометром.

Описание метода

Перед работой необходимо подготовить капилляры. С этой целью отбирают капилляры с одинаковым внутренним диаметром. На капилляры наносят метку на расстоянии 1/3 длины от любого края.
На два часовых стекла или в две лунки планшета для иммунологических исследований наливают по 0.2 мл исследуемой крови. В первую порцию вносят 0.05 мл раствора Кон А в концентрации 10 мкг/мл (препарат растворяют в стерильном изотоническом растворе хлорида натрия. Полученными смесями заполняют капилляры на 2 /3 длины (до метки). На каждую пробу берут не менее 6 капилляров (3 опытных и 3 контрольных). Заполненные капилляры запаивают воском или пластилином и помещают в маркированные центрифужные пробирки (контрольные и опытные капилляры помещают в разные пробирки). Капилляры в пробирке необходимо зафиксировать комочком ваты или пластилином в строго вертикальном положении. После этого капилляры центрифугируют в течение 5 мин при 800 об/мин, а затем помещают в термостат в вертикальном положении и инкубируют при температуре 37°С в течение 24 часов.


Учет результатов

После инкубации производят учет результатов. С этой целью под микроскопом с помощью окуляр-микрометра определяют величину миграции основной массы лейкоцитов от границы эритроцитарного осадка в контроле и опыте. Результаты выражают в виде процента миграции в опыте относительно контроля.
В норме процент миграции составляет 40-70%; повышение до 90 % или снижение до 30% является умеренным; выше 90% и ниже 30% - значительным. Увеличение показателя миграции свидетельствует о снижении функциональной активности лимфоцитов: их способности продуцировать лимфокины, в частности, фактора, угнетающего миграцию лейкоцитов (ФУМ). При радиационном иммунодефиците наиболее ранним и типичным признаком является увеличение показателя миграции до 90% и выше.


Похожие статьи Добавь в закладки

Категория: Иммунология | Добавил: MedVUZ | Теги: Лейкоциты, лабораторная диагностика, т-лимфоциты, иммунология, РТМЛ
Просмотров: 8044 | Загрузок: 0 | Рейтинг: 0.0/0
Всего комментариев: 0
Добавлять комментарии могут только зарегистрированные пользователи.
[ Регистрация | Вход ]

РязГМУ поступить контакты сайт история медицинская академия информация скачать акушерство ОЗЗ Доктор Хаус Scrubs сериалы хирургия телефон лекции стоматология офтальмология Хью Лори клиника экзамен Теория Лжи юмор интерны актёры Доктор Тырса терапия PDF практические навыки фармакология учебник диагностика классификация лечение ЕГЭ травматология